¿Puede la cromatografía a contracorriente de alta velocidad extraer xantohumol?

Sí.Polvo de xantohumol de lúpulo, un flavonoide prenilado que se encuentra en el lúpulo, se puede extraer mediante cromatografía en contracorriente de alta velocidad (HSCCC). Los compuestos con baja solubilidad o aquellos sensibles al calor o a los disolventes se pueden separar y purificar eficazmente a partir de mezclas complejas utilizando la técnica HSCCC. El xantohumol tiene un peso molecular relativamente bajo y es soluble en disolventes no polares y moderadamente polares. HSCCC utiliza un proceso de partición líquido-líquido, que es muy adecuado para separar flavonoides y otros productos naturales. Los compuestos delicados como el xantohumol se pueden separar utilizando este método sin el riesgo de degradación que a veces ocurre con técnicas de separación más agresivas como la cromatografía en columna convencional porque es suave, eficiente en solventes y no destructivo. Los parámetros clave en la extracción de xantohumol usando HSCCC implicarían seleccionar un sistema solvente apropiado que optimice la partición entre las fases estacionaria y móvil y ajustar el caudal y otras condiciones operativas para lograr la mejor eficiencia de separación.

 

 

La cromatografía a contracorriente de alta velocidad (HSCCC) es un tipo de técnica de cromatografía líquido-líquido que utiliza dos fases líquidas inmiscibles para separar compuestos en función de su comportamiento de partición entre las dos fases. A diferencia de la cromatografía en fase sólida tradicional, donde la fase estacionaria suele ser sólida (como el gel de sílice), HSCCC utiliza dos fases líquidas, siendo una la fase estacionaria (mantenida en una columna) y la otra como fase móvil (que fluye a través de la columna). sistema).

HSCCC se utiliza con frecuencia para separar mezclas complejas, especialmente para productos farmacéuticos, biomoléculas y productos naturales. Sus beneficios incluyen alta resolución, poca pérdida de producto y la capacidad de separar compuestos que las técnicas de cromatografía en fase sólida pueden resultar difíciles.

 Cómo funciona HSCCC

A. Dos fases líquidas

a. Fase estacionaria: una de las fases líquidas es estacionaria (sin movimiento) y normalmente se retiene en la columna debido a la gravedad o la fuerza centrífuga.

b. Fase móvil: la segunda fase líquida es móvil y fluye continuamente a través de la columna, permitiendo que el producto se mueva e interactúe con la fase estacionaria.

B. Principio de Separación (Partición)

a. La separación en HSCCC se basa en el principio de cromatografía de partición. Los compuestos en el producto se dividen entre las dos fases líquidas inmiscibles. Los compuestos se distribuirán entre las fases estacionaria y móvil dependiendo de su solubilidad relativa (coeficiente de partición) en cada fase.

b. Un compuesto que es más soluble en la fase móvil se moverá más rápido a través de la columna, mientras que un compuesto más soluble en la fase estacionaria interactuará más y viajará más lentamente.

C. Fuerza centrífuga

a. Una de las características clave de HSCCC es el uso de fuerza centrífuga (en el instrumento HSCCC) para evitar que las fases líquidas inmiscibles se mezclen. Esto generalmente se logra haciendo girar la columna a altas velocidades, lo que genera fuerzas centrífugas que ayudan a mantener el sistema de fase líquido-líquido.

b. Esta fuerza centrífuga también juega un papel fundamental al forzar la fase móvil a través de la fase estacionaria, lo que permite la separación de compuestos en función de sus coeficientes de partición.

D. Elución en gradiente

a. Al igual que en la cromatografía tradicional, HSCCC puede emplear elución en gradiente, donde la composición de la fase móvil cambia con el tiempo. Esto resulta útil cuando se trata de productos que contienen una amplia gama de polaridades, ya que la composición de la fase móvil se puede ajustar para optimizar la separación.

E. Detección

a. Una vez completada la separación, los componentes individuales se pueden recolectar de diferentes salidas del sistema HSCCC. Se pueden utilizar varios detectores para controlar los compuestos separados, como detectores de absorbancia UV-Vis, detectores de fluorescencia o espectrometría de masas.

 Componentes clave de HSCCC

A. Instrumento HSCCC:

Esto normalmente consiste en:

a. Columna giratoria: columna cilíndrica que gira a altas velocidades. Está lleno de una de las fases líquidas inmiscibles.

b. Depósitos de líquidos: contienen las dos fases líquidas inmiscibles que se bombean al sistema.

do. Sistema de Inyección de Producto: Aquí es donde se introduce el producto en el sistema de cromatografía.

d. Sistema de Elución: El sistema que bombea la fase móvil a través de la columna giratoria.

mi. Colector de fracciones: recopila los componentes separados después de que salen de la columna.

B. Sistema de fases: Las dos fases líquidas inmiscibles utilizadas en HSCCC deben seleccionarse cuidadosamente. Estos podrían incluir:

a. Mezclas acuosas-orgánicas: sistemas disolventes de uso común, como mezclas de agua y disolventes orgánicos, por ejemplo, agua-acetato de etilo.

b. Dos disolventes orgánicos: en algunos casos, se pueden utilizar dos disolventes orgánicos inmiscibles.

 Ventajas del HSCCC

A. Sin fase estacionaria sólida

HSCCC no depende de fases estacionarias sólidas como el gel de sílice, lo que significa que no hay riesgo de adsorción irreversible o degradación del producto debido a interacciones con la fase estacionaria.

B. Alta resolución

La eficiencia de separación es generalmente alta, lo que resulta especialmente beneficioso para purificar productos naturales u otras mezclas complejas donde los componentes tienen propiedades muy similares.

C. No destructivo

Como HSCCC implica interacciones líquido-líquido, a menudo resulta en un proceso de separación más suave, minimizando la degradación o pérdida de compuestos sensibles.

D. Pérdida mínima de producto

Dado que el proceso utiliza únicamente fases líquidas, la pérdida de producto suele ser mucho menor en comparación con las técnicas cromatográficas tradicionales.

E. Versátil

Se puede aplicar a una amplia gama de sustancias, incluidos productos farmacéuticos, biomoléculas y productos naturales con una variedad de polaridades.

 Aplicaciones

HSCCC se utiliza ampliamente en farmacología, química, biotecnología y aislamiento de productos naturales. Las aplicaciones específicas incluyen:

a. Purificación de Productos Naturales: Para aislar compuestos bioactivos de extractos de plantas, organismos marinos o caldos de fermentación.

b. Aislamiento de compuestos farmacéuticos: para separar y purificar moléculas de fármacos de mezclas complejas.

do. Purificación de Biomoléculas: Como proteínas, ácidos nucleicos y péptidos.

d. Enantioseparación: para separar compuestos quirales, lo cual es importante en la industria farmacéutica para producir medicamentos ópticamente puros.

 

 

Se han procesado con éxito varios extractos de plantas utilizando HSCCC para aislar una amplia gama de compuestos bioactivos. A continuación se muestran algunos productos derivados de plantas específicos que se han aislado mediante este método:

★ Flavonoides

a. Rutina de Ruta graveolens (Rue)

b. Quercetina de Hibiscus rosa-sinensis y Allium cepa (cebolla)

do. Luteolina de Chamomilla recutita (manzanilla)

★ Alcaloides

a. Berberina de Berberis vulgaris (agracejo)

b. Esparteína de Cytisus scoparius (escoba escocesa)

do. Corydine de la especie Corydalis

★ Terpenoides y Aceites Esenciales

a. -Cariofileno de Cinnamomum verum (Canela)

b. Artemisinina de Artemisia annua (ajenjo dulce)

do. Triterpenos de Ganoderma lucidum (hongo Reishi)

d. Limoneno de Citrus sinensis (Cáscara de naranja)

★ Ácidos fenólicos

a. Ácido cafeico de Echinacea purpurea

b. Ácido clorogénico de Coffea arabica (Café)

do. Ácido gálico de Camellia sinensis (té)

d. Ácido rosmarínico de Rosmarinus officinalis (Romero)

★ Glucósidos

a. Glucósidos de antraquinona de Rheum palmatum (ruibarbo)

b. Saponinas de Glycyrrhiza glabra (Regaliz)

do. Ginsenósidos de Panax ginseng (Ginseng)

d. Genipósido de Gardenia jasminoides

★ Glicósidos flavonoides

a. Isoquercitrina de Cucumis sativus (pepino)

b. Hiperósido de Hypericum perforatum (hierba de San Juan)

★ Cumarinas

a. Escopoletina de Scopolia japonica

b. Umbeliferona de Coriandrum sativum (Cilantro)

★ esteroides

a. -Sitosterol de Pygeum africanum (ciruelo africano)

b. Estigmasterol de Glycine max (Soja)

do. Campesterol de Brassica oleracea (repollo)

★ Polisacáridos

a. Ganoderan de Ganoderma lucidum (hongo Reishi)

b. Quitosano de hongos (particularmente especies de Criniella)

★ Aminoácidos y Péptidos

a. Inhibidores de aminopeptidasas de Pisum sativum (guisantes)

b. Glutatión de Spinacia oleracea (espinacas)

 

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